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3种地格达类蒙药材中獐牙菜苦苷和当药黄素的初步比较研究

时间:2015-04-16 10:55 点击:
[摘要] 肋柱花、扁蕾和尖叶假龙胆分别为龙胆科肋柱花属、扁蕾属和假龙胆属植物,三者均可作为地格达类蒙药广泛用于肝胆等疾病的治疗,临床效果显著。该文采用高效液相色谱法对内蒙古地区3种蒙药材中獐牙菜苦苷和当药黄素进行初步比较研究,旨在为临床安全用
  [摘要] 肋柱花、扁蕾和尖叶假龙胆分别为龙胆科肋柱花属、扁蕾属和假龙胆属植物,三者均可作为地格达类蒙药广泛用于肝胆等疾病的治疗,临床效果显著。该文采用高效液相色谱法对内蒙古地区3种蒙药材中獐牙菜苦苷和当药黄素进行初步比较研究,旨在为临床安全用药提供科学依据。文中所采用色谱柱为Phenomenex C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇(A)和水(B)梯度洗脱,流速1.5 mL·min-1,柱温25 ℃,检测波长237 nm。结果显示3种蒙药中均含有獐牙菜苦苷和当药黄素,其含量与植物种类和产地关系密切。不同产地肋柱花中獐牙菜苦苷质量分数为1.73% ~ 2.72%,当药黄素质量分数为0.43% ~ 0.96%;阿拉善左旗产扁蕾中獐牙菜苦苷的质量分数为0.38%;其他产地扁蕾及尖叶假龙胆中獐牙菜苦苷和当药黄素均为定性检出。因此,从肋柱花等3种蒙药中獐牙菜苦苷、当药黄素的初步测定结果分析,三者化学成分因种类和产地不同而差异较大,临床用药需按疾病种类不同仔细斟酌,不宜盲目混用。 
  [关键词] 肋柱花;扁蕾;尖叶假龙胆;獐牙菜苦苷;当药黄素 
  [Abstract] Lomatogonium rotatum (L.) Fries,Gentianopsis barbata (Froel) Ma,and Gentianella acuta (Michx.) Hulten,the three kinds of Digeda-species Mongolian medicinal materials belonging to the family Gentianaceae,had been widely used for the treatment of liver diseases. To analyze comparatively the content of swertiamarin and swertisin among these three kinds of Digeda-species Mongolian medicinal materials. HPLC method was applied for qualitative and quantitative analysis of swertiamarin and swertisin. The Phenomenex C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm) was used,chromatographic methanol and water as mobile phase,the flow rate was 1.5 mL·min-1 with UV detected at 237 nm,column oven temperature was 25 ℃. Results showed that the contents of swertiamarin and swertisin were closely related the different species and producing areas. The content range of swertiamarin in L. rotatum from different habitats was 1.73%-2.72%,0.43%-0.96% for the swertisin content; the content of swertiamarin in G. barbata from Alxa Left Banner was 0.38%,and the content of swertiamarin and swertisin in G. barbata from the others habitats and G. Acuta from different habitats were all detected qualitatively. The contents of swertiamarin and swertisin among these medicinal plants showed a significant difference due to the different species and producing areas. As a consequence,these medicinal plants should not be put together for clinical applications. 
  [Key words] Lomatogonium rotatum; Gentianopsis barbata; Gentianella acuta; swertiamarin; swertisin 
  肋柱花(蒙药名哈毕日干-地格达)Lomatogoium rotatum(L.)Fries ex Nym、扁蕾(蒙药名黑特木尔-地格达)Gentianopsis barbata(FreL.) Ma、尖叶假龙胆(吉斯-地格达代用品)Gentianella acuta (Michx.) Hulten分别为龙胆科肋柱花属、扁蕾属和假龙胆属植物[1],三者均为地格达类蒙药的主要基原植物,在《蒙药正典》、《蓝琉璃》、《晶珠本草》、《内蒙古中草药》、《中华本草》(蒙药卷)等古今蒙、藏书籍中均有较详细的记载。其性寒,味苦,具有清热利胆、退黄、除湿、平肝风、舒肝健胃的功效,在地丁三味汤散、肋柱花四味汤散、利胆八味散、四味地格达散、伊赫哈日十二味散、土木香十味汤散等经典蒙药处方中作为君药配伍使用,临床上主要用于肝胆等疾病的治疗,效果显著[2-3]。龙胆科地格达类蒙药主要含有龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、芒果苷、当药黄素、齐墩果酸等酮、环烯醚萜类及三萜类等成分,近年来大量科学研究表明獐牙菜苦苷和当药黄素等具有不同程度的利胆、保肝生物活性,为龙胆科地格达类蒙药治疗肝胆疾病的物质基础。但是文献显示,龙胆科地格达类蒙药属间、种间差异较大[4],本文以内蒙古地区不同产地的肋柱花、扁蕾和尖叶假龙胆为研究对象,通过高效液相色谱法对3种药材中獐牙菜苦苷和当药黄素进行初步比较分析,旨在为“地格达类”蒙药临床用药的安全性、有效性评价奠定基础。
  1 材料 
  岛津 LC-20AT 高效液相色谱仪,配置LC-20ATvp输液泵,SPD-M20Avp检测器,SCL-20ATvp色谱工作站(日本岛津);FA1004型电子分析天平(上海恒平科学仪器有限公司);DS-2510DT超声波清洗仪(上海生析超声仪器有限公司)。 
  獐牙菜苦苷对照品购于中国食品药品检定研究院,批号0785-200203,纯度>98%;当药黄素对照品购于上海融禾医药科技发展公司,批号为080710,纯度>99.8%。 
  甲醇(色谱纯,天津市西华特种试剂厂),所用水为娃哈哈纯净水,其他试剂均为分析纯。 
  样品为肋柱花、扁蕾和尖叶假龙胆的干燥全草,均采自内蒙古地区,并经包头医学院李旻辉教授鉴定,见表1。 
  2 方法与结果 
  2.1 对照品溶液的制备 精密称取獐牙菜苦苷5.4 mg、当药黄素3.3 mg,置10 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,过0.45 μm微孔滤膜,备用(每1 mL中含獐牙菜苦苷0.54 mg、含当药黄素0.33 mg)。 
  2.2 供试品溶液的制备 取待测药材粉末约0.2 g,精密称定,置50 mL具塞锥形瓶中,精密加入甲醇溶液25 mL,密塞,称定质量,超声提取30 min,放冷,再称定质量,用甲醇溶液补足减失的质量,摇匀,过滤,取续滤液,过0.45 μm微孔滤膜,作为供试品溶液。 
  2.3 色谱条件 Phenomenex OOG-4252-EO色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相甲醇(A) -水(B),梯度洗脱,0~15 min,20%~50% A;15~35 min,50%~100% A;35~60 min,100% A。流速1.5 mL·min-1;柱温25 ℃;检测波长237 nm。对照品溶液和供试品溶液的HPLC图见图1。 
  2.4 方法学考察 精密吸取混合对照品溶液0.5,1,2,4,6,8,10 μL,按2.3项下色谱条件分别进样测定。以峰面积对进样量(μg)进行回归,得线性方程,獐牙菜苦苷Y=1 095 589X-79 947(r=0.999 8),当药黄素Y=1 577 466X-80 927(r=0.999 6)。结果表明,獐牙菜苦苷、当药黄素分别在0.27~5.40,0.16~3.30 μg线性关系良好。 
  方法的精密度试验、稳定性试验、重复性试验、回收率试验课题组已经完成,结果均符合要求,结果详见文献[5]。 
  2.5 样品测定 取不同产地的肋柱花、扁蕾和尖叶假龙胆样品,按2.2方法制备样品溶液,按2.3色谱条件进行检测。分别精密吸取10 μL进样测定,以外标法计算样品含量,结果见表2。 

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