2 结果与分析 2.1 PCR扩增产物的多态性分析 6条引物均能对12份樱桃种质基因组DNA扩增出清晰稳定的多态性条带,图1为引物ISSR36扩增的带型。本试验共检测到48个遗传位点,其中包含44个多态性遗传位点,多态性位点比率为91.67%(表2)。同一样品的不同引物扩增条带数量和多态性差异较大。 2.2 遗传相似性 12份樱桃种质个体间的相似系数为0.29~0.98,平均值为0.65。其中1与4和2与3的遗传相似系数最大,为0.98,说明其遗传距离最近,即亲缘关系最近,5与10 的遗传相似系数最小,仅为0.29,说明二者遗传相似性最低,亲缘关系最远。 2.3 聚类分析 对供试12份种质进行聚类分析,结果表明,品种间遗传背景有较大的差异,遗传多样性丰富。在相似系数0.58处,12个品种可聚类为3个组(图2),其中,1、4、10、2、3、11和12聚为一个分支,为组Ⅰ;5和9聚为一个分支,为组Ⅱ;6、7和8聚为一个分支,为组Ⅲ。 3 结论 6条ISSR 引物均能有效扩增出多态性条带,说明ISSR标记是樱桃遗传分析的有效工具。供试12个样品间的相似系数分布在0.29~0.98之间,ISSR标记能将供试样品完全区分开。品种间具有丰富的遗传多样性,亲缘关系复杂,遗传背景存在很大差异。物种的地理分布特征也可能影响其遗传多样性水平,一般而言,广泛分布比狭域分布的物种具有更高的遗传多样性[9],供试樱桃品种间表现出较高遗传多样性,可能与它们地理分布相对较广有关。参 考 文 献: [1] 俞德浚.中国植物志[M].北京:科学出版社, 1986: 46-87. [2] 于亚军,代汉萍,李宝江,等. 世界樱桃育种进展[J]. 果树学报,2003,20(2):135-139. [3] 胡正刚.中国樱桃的分布及生产现状[J].落叶果树, 1996(3):29-30. [4] Li M M,Cai Y L,Qian Z Q, et al. Genetic diversity and differentiation in Chinese sour cherry Prunus pseudocerasus Lindl., and its implications for conservation[J]. Genetic Resources and Crop Evolution, 2009, 56(4): 455-464. [5] Zietkiewicz E, Rafalski A, Labuda D. Genome fingerprinting by simple sequence repeat (SSR)-anchored polymerase chain reaction amplification[J]. Genomics, 1994, 20: 176-183. [6] Sanchez de la Hoz M P,Davila J A,Loarce Y,et al. Simple sequence repeat primers used in polymerase chain reaction amplifications to study genetic diversity in barley [J]. Genome, 1996, 39(1): 112-117. [7] Ratnaparkhe M B,Santra D K,Tullu A,et al. Inheritance of inter-simple-sequence-repeat polymorphisms and linkage with a fusarium wilt resistance gene in chickpea [J].Theor. Appl. Genet., 1998, 96(3/4): 348-353. [8] 陈新.榛子花芽转录组文库的Solexa 测序及冷调节基因的表达谱分析[D].北京:中国林业科学研究院,2011. [9] Nybom H, Bartish I V. Effects of life history traits and sampling strategies on genetic diversity estimates obtained with RAPD markers in plants [J]. Perspectives in Plant Ecology, Evolution and Systematics, 2000, 3(2):93-114. |